Fig. 1 基因治療[1][2]
phi29 DNA polymerase具有很強的鏈置換活性和連續合成的特性，可用于在體外合成雙鏈DNA。
注：在某些應用場景下，使用此酶會有專利限制
TelN Protelomerase可用于合成線性閉合mini DNA載體，其在識別位點 TelRL（56bp）切割雙鏈DNA，并在酶切位點處留下共價封閉的發夾結構，有效地將環狀DNA轉化為有發夾末端的線性DNA。在實際應用中會將質粒上的目的片段和骨架序列通過TelRL位點間隔。
注：TelRL底物序列需要專利授權
Fig.2 TelN Protelomerase可有效將環狀DNA轉化為有發夾末端的線性DNA，其活性與知名供應商相當。在50 μl體系中加入513 fmol dsDNA和不同酶量的TelN Protelomerase（由5 U/assay依次2倍梯度稀釋，NC為陰性對照），30℃反應30 min。
經TelN Protelomerase切割-連接形成的DNA載體有兩類，一類含骨架序列，一類含目的片段。骨架序列上有相應的限制性酶切位點，愷佧生物提供高活性的限制性內切酶用于酶切骨架序列。
經TelN Protelomerase切割-連接形成的DNA載體有兩類，一類含骨架序列，一類含目的片段。骨架序列上有相應的限制性酶切位點，經酶切后形成平末端或粘性末端，進一步經Exonuclease III作用，達到降解骨架序列，富集目的片段的目的。
主要參與細胞與基因治療藥物（如造血干細胞、T細胞等）的基因修飾, 其中，GMP級Cas9核酸酶于高標準的CGT蛋白酶GMP生產車間生產，并經體外胞內雙重驗證。已完成DMF備案（編號：036578），并已協助客戶完成IND申報；hfCas12Max?是輝大基因（HuidaGene）自主開發的新型DNA基因編輯工具酶，愷佧生物獲得在大中華區研究級蛋白的生產銷售排他許可，以及GMP級產品的生產銷售普通許可。
AccuBase?是通過基因工程手段設計的CBE，將窗口范圍內的 C 脫氨形成 U，U利用細胞內修復機制轉變為 T，從而實現C→T的轉變，在編輯的過程中不會引入 DSB，確保了編輯的安全性。此外，創造性地將脫氨酶可逆的包裹起來，只有當 sgRNA 與靶位點結合時才能發揮脫氨作用，大幅度降低了與非靶 DNA 的隨機結合，可以實現接近零脫靶的效果，同時維持高效的編輯活性。
定量檢測基因編輯細胞藥物在回輸人體之前胞外或胞內中Cas9核酸酶的殘留。試劑盒檢測范圍為0.25 ng/ml-16 ng/ml，靈敏度可達0.125 ng/ml。
Fig. 10 擬合標準曲線，R2達到0.9997。
Fig. 11 在稀釋緩沖液中檢測不同濃度Cas9樣本的加樣回收率均介于80%-120%，表明本試劑盒檢測Cas9核酸酶殘留的準確度高。
使用三批次試劑盒分別對高中低三個不同濃度的Cas9核酸酶進行檢測，每個樣本重復檢測10次，計算這10次檢測的平均值(M)和標準差(SD)，計算變異系數(CV)。
如Table 1所示，每批次試劑盒檢測高中低三個不同濃度的Cas9樣本的CV均小于10%，表明試劑盒對Cas9的殘留檢測具有良好的批內重復性。
使用三批次試劑盒對高中低三個不同濃度的Cas9核酸酶進行檢測，每個樣本使用同批次檢測10次，三批次共檢測30次，計算這30次檢測的平均值(M)和標準差(SD)，計算變異系數(CV)。
如Table 2所示，每個樣本三個批次間的CV均小于15%，表明試劑盒對Cas9的殘留檢測具有良好的批間重現性。
AAV是基因治療領域常用的病毒載體，AAV病毒顆粒滴度的檢測方法有Dot blot、TEM、AUC、ELISA、SEC-MALS等。愷佧生物開發了AAV2/5/6/8/9 Titration ELISA Kit，旨在為AAV病毒顆粒滴度的測定提供更便捷、更可靠的解決方案。
Fig. 12 擬合AAV9 Titration ELISA Kit的標準曲線，其定量范圍為2.03E+07-1.30E+09 capsids/ml。
ELISA間接法檢測不同濃度的AAV9抗體與AAV2/5/8/9交叉結合，以檢測抗體的濃度為橫坐標，OD450值為縱坐標繪制曲線；ELISA夾心法檢測AAV9抗體與完整AAV9以及變性AAV9的結合，以AAV9的顆粒滴度為橫坐標，OD450值為縱坐標繪制曲線。
使用同一試劑盒測試高中低三個不同滴度AAV9樣本在稀釋緩沖液中的加樣回收率。
Fig. 15 在稀釋緩沖液中檢測不同滴度AAV9樣本的加樣回收率均介于80%-120%，表明本試劑盒檢測AAV9滴度的準確度高。
在基因治療領域，主要用于藥物生產過程中去除宿主DNA和質粒DNA等雜質，GMP級MaxNuclease全能核酸酶于高標準的CGT蛋白酶GMP生產車間生產，不使用含動物源原材料，分析方法經系統驗證，并經過全方位的QC放行檢測，滿足從研發到商業大規模生產的使用需求，并且已完成DMF備案（編號：036799）。
Fig. 16 MaxNuclease降解核酸效果
定量檢測基因治療藥物中MaxNuclease全能核酸酶的殘留，試劑盒檢測范圍為46.88 pg/ml-3000 pg/ml，靈敏度可達23.44 pg/ml。
Fig. 17 擬合標準曲線，R2達到0.9995。
| 貨號 | 產品名稱 | 規格 | |
| PHI-BE101 | phi29 DNA Polymerase | 500 U/5000 U | 立即詢價 |
| TLN-BE001 | TelN Protelomerase | 10 kU/50 kU | 立即詢價 |
| BSA-EE101 | Bsal | 1000 U/5000 U | 立即詢價 |
| GMP-BSA-EE101 | Bsal(GMP grade) | 20 kU/400 kU | 立即詢價 |
| BSP-BE101 | BspQl | 1000 U/10 kU | 立即詢價 |
| SAP-SE101 | Sapl | 1000 U/10 kU | 立即詢價 |
| SAP-SE102 | Sapl V2.0 | 1000 U/10 kU | 立即詢價 |
| XBA-EE101 | Xbal | 2000 U/20 kU | 立即詢價 |
| EXO-EE101 | Exonuclease III | 500 U/5000 U | 立即詢價 |
| KACTUS-CAS9 | Cas9 Nuclease | 1 mg/3 mg | 立即詢價 |
| KACTUS-CAS9-GMP | Cas9 Nuclease (GMP grade) | 3 mg | 立即詢價 |
| CAS-MM00B | Cas9 (CRISPR Associated Protein 9) ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| CAS-EE111 | SpCas9 D10A Nickase | 1 mg | 立即詢價 |
| CAS-EE121 | AsCas12a Nuclease | 1 mg | 立即詢價 |
| CAS-EE128 | hfCas12Max? | 500 μg/1 mg | 立即詢價 |
| KD-0001 | BS-EP1（Trade name: AccuBase?） | 200 μg/500 μg/1 mg | 立即詢價 |
| GMP-KD-0001 | BS-EP1（Trade name: AccuBase?), GMP grade | 1 mg | 立即詢價 |
| AV2-MM00B | AAV2 Titration ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| AV5-MM00B | AAV5 Titration ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| AV6-MM00B | AAV6 Titration ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| AV8-MM00B | AAV8 Titration ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| AV9-MM00B | AAV9 Titration ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
| NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶 | 50 kU/250 kU/5 MU | 立即詢價 |
| GMP-NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶(GMP grade) | 250 kU/5 MU | 立即詢價 |
| NUC-SE00B | MaxNuclease ELISA Kit | 96 T | 立即詢價 |
[1] 體內基因治療產品藥學研究與評價技術指導原則（試行）
[2] Savi? N, Schwank G. Advances in therapeutic CRISPR/Cas9 genome editing. Transl Res.
