Fig. 1 免疫細(xì)胞治療一般流程[1][2]
胞內(nèi)抗原靶點(diǎn)是細(xì)胞治療的一大方向。胞內(nèi)抗原被降解后的肽段會(huì)與MHC形成復(fù)合物而被呈遞在細(xì)胞表面以供TCR識(shí)別。通過靶向MHC多肽復(fù)合物，可實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的殺傷。
愷佧生物MHC多肽復(fù)合物涵蓋諸多熱門靶點(diǎn)，產(chǎn)品包括復(fù)合物單體、四聚體、熒光標(biāo)記的四聚體等不同形式，可應(yīng)用于T細(xì)胞治療藥物開發(fā)中的免疫或篩選等研究。同時(shí)提供TCR和TCR related drug等個(gè)性化定制表達(dá)服務(wù)，滿足客戶的多樣需求。
細(xì)胞療法的靶點(diǎn)中包含了多次跨膜蛋白（如GPCR家族）以及一些通過直接免疫難以獲得理想抗體序列的靶點(diǎn)。愷佧生物通過VLP展示技術(shù)，能更好地保持多次跨膜蛋白的正確構(gòu)象，同時(shí)提高了蛋白的免疫原性。另外，針對(duì)不同的抗原可設(shè)計(jì)不同的VLP骨架，并可提供個(gè)性化定制服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞藥物順利進(jìn)行生產(chǎn)制備的保證，如免疫細(xì)胞治療過程中T細(xì)胞、NK細(xì)胞和干細(xì)胞源性免疫細(xì)胞治療中所需的干細(xì)胞的培養(yǎng)，以及干細(xì)胞治療中ESC、MSC、iPSC的培養(yǎng)等。
Fig. 12 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)蛋白Laminin 521能有效促進(jìn)人iPSC的生長(zhǎng)
Fig. 13 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)蛋白Laminin 521可維持干細(xì)胞分化潛能
熒光或生物素標(biāo)記的蛋白可用于治療性細(xì)胞生產(chǎn)制備和質(zhì)檢中的多種檢測(cè)過程，如抗體篩選（如scFv等）、CAR親和力研究、CAR-T陽性率檢測(cè)、TCR篩選或檢測(cè)，以及Blocking Assay等，愷佧生物提供高質(zhì)量FITC、PE等不同熒光標(biāo)記以及生物素標(biāo)記的蛋白等，滿足細(xì)胞水平在內(nèi)的不同分析場(chǎng)景。
Fig. 14 經(jīng)細(xì)胞水平流式檢測(cè)，F(xiàn)ITC-Compatible Human CD19 protein可和Anti-CD19-CAR T細(xì)胞特異性結(jié)合。
Fig. 15 經(jīng)細(xì)胞水平流式檢測(cè)，熒光標(biāo)記的HLA-A*02:01&B2M&NY-ESO-1 (SLLMWITQC)復(fù)合物四聚體可很好地與HLA-A*02:01&B2M&NY-ESO-1 TCR細(xì)胞結(jié)合。
同種異體通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品，如UCAR-T，需通過基因編輯技術(shù)，敲除供體T細(xì)胞上與免疫排斥反應(yīng)相關(guān)的基因，避免引起GvHD和HvGR等免疫排斥反應(yīng)。愷佧生物提供Cas9、Cas12a、hfCas12Max?等基因編輯核酸酶，可用于UCAR-T細(xì)胞治療藥物的基因修飾。其中，GMP級(jí)別的Cas9核酸酶已完成DMF備案（編號(hào)：036578），可協(xié)助客戶完成IND申報(bào)。
堿基編輯蛋白相較于基因編輯酶，在編輯的過程中不會(huì)引入DSB，確保了編輯的安全性。AccuBase?是通過基因工程手段設(shè)計(jì)的CBE，將窗口范圍內(nèi)的 C 脫氨形成 U，U利用細(xì)胞內(nèi)修復(fù)機(jī)制轉(zhuǎn)變?yōu)?T，從而實(shí)現(xiàn)C→T的轉(zhuǎn)變。此外，創(chuàng)造性地將脫氨酶可逆的包裹起來，只有當(dāng) sgRNA 與靶位點(diǎn)結(jié)合時(shí)才能發(fā)揮脫氨作用，大幅度降低了與非靶 DNA 的隨機(jī)結(jié)合，可以實(shí)現(xiàn)接近零脫靶的效果，同時(shí)維持高效的編輯活性。
定量檢測(cè)基因編輯細(xì)胞藥物在回輸人體之前胞外或胞內(nèi)中Cas9核酸酶的殘留。試劑盒檢測(cè)范圍為0.25 ng/ml-16 ng/ml，靈敏度可達(dá)0.125 ng/ml。
Fig. 22 多項(xiàng)式擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2達(dá)到0.9997。
在細(xì)胞治療領(lǐng)域，主要用于藥物生產(chǎn)過程中去除宿主DNA和質(zhì)粒DNA等雜質(zhì)，MaxNuclease全能核酸酶于高標(biāo)準(zhǔn)的CGT蛋白酶GMP生產(chǎn)車間生產(chǎn)，不使用含動(dòng)物源原材料，分析方法經(jīng)系統(tǒng)驗(yàn)證，并經(jīng)過全方位的QC放行檢測(cè)，滿足從研發(fā)到商業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)的使用需求，已完成DMF備案（編號(hào)：036799）。
Fig. 23 MaxNuclease降解核酸效果
定量檢測(cè)細(xì)胞治療藥物中全能核酸酶的殘留，試劑盒檢測(cè)范圍為46.88 pg/ml-3000 pg/ml，靈敏度可達(dá)23.44 pg/ml。
Fig. 24 線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2達(dá)到0.9995。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | |
| KACTUS-CAS9 | Cas9 Nuclease | 1 mg/3 mg | 立即詢價(jià) |
| KACTUS-CAS9-GMP | Cas9 Nuclease(GMP grade) | 3 mg | 立即詢價(jià) |
| CAS-MM00B | Cas9 (CRISPR Associated Protein 9) ELISA Kit | 96 T | 立即詢價(jià) |
| CAS-EE111 | SpCas9 D10A Nickase | 1 mg | 立即詢價(jià) |
| CAS-EE121 | AsCas12a Nuclease | 1 mg | 立即詢價(jià) |
| CAS-EE128 | hfCas12Max? | 500 μg/1 mg | 立即詢價(jià) |
| KD-0001 | BS-EP1(Trade name: AccuBase?) | 200 μg/500 μg/1 mg | 立即詢價(jià) |
| GMP-KD-0001 | BS-EP1(Trade name: AccuBase?), GMP grade | 1 mg | 立即詢價(jià) |
| NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶 | 50 kU/250 kU/5 MU | 立即詢價(jià) |
| GMP-NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶(GMP grade) | 250 kU/5 MU | 立即詢價(jià) |
| NUC-SE00B | MaxNuclease ELISA Kit | 96 T | 立即詢價(jià) |
[1] Fang KK, Lee JB, Zhang L. Adoptive Cell Therapy for T-Cell Malignancies. Cancers (Basel). 2022 Dec 23;15(1):94.
[2] Mangal JL, Handlos JL, Esrafili A, Inamdar S, Mcmillian S, Wankhede M, Gottardi R, Acharya AP. Engineering Metabolism of Chimeric Antigen Receptor (CAR) Cells for Developing Efficient Immunotherapies. Cancers (Basel). 2021 Mar 5;13(5):1123.
[3] Maalej KM, Merhi M, Inchakalody VP, Mestiri S, Alam M, Maccalli C, Cherif H, Uddin S, Steinhoff M, Marincola FM, Dermime S. CAR-cell therapy in the era of solid tumor treatment: current challenges and emerging therapeutic advances. Mol Cancer. 2023 Jan 30;22(1):20.
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