MaxNuclease全能核酸酶及MaxNuclease ELISA Kit
MaxNuclease全能核酸酶 (DMF Filed)
隨著生物醫(yī)藥領(lǐng)域的迅猛發(fā)展，生物制品的種類日益趨增。與此同時，生物制品也有著嚴(yán)格的質(zhì)控體系，其中，殘留核酸是國內(nèi)外藥品監(jiān)管機構(gòu)的關(guān)注重點。AAV載體、抗體藥、疫苗、重組蛋白藥等制品是用連續(xù)傳代的細(xì)胞表達生產(chǎn)，即使經(jīng)過精細(xì)的純化工藝，制品中也有可能殘留宿主核酸，殘留的核酸可能會帶來致病、致瘤等風(fēng)險。我國對生物制品中的核酸殘留做了嚴(yán)格要求，2020版《中國藥典》中明確指出酵母、大腸桿菌表達的生物制品的核酸殘留不超過10ng/劑；CHO細(xì)胞表達的重組乙肝疫苗、人促紅素的核酸殘留不超過10pg/劑、100pg/10000IU；Vero細(xì)胞表達的狂犬疫苗的核酸殘留不超過3ng/劑等。
此外，CAR-T細(xì)胞治療行業(yè)、慢病毒的大規(guī)模純化、蛋白提取等領(lǐng)域都需要嚴(yán)格控制核酸的殘留。
目前，核酸去除的方法主要有酶解法、聚乙烯亞胺（PEI）沉淀法、離子交換層析等。酶法中的全能核酸酶因高效、經(jīng)濟、操作簡便等優(yōu)勢廣受青睞。
愷佧生物提供GMP級全能核酸酶—MaxNuclease，參照藥典標(biāo)準(zhǔn)進行開發(fā)和驗證，生產(chǎn)過程完全按照GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)進行，保證生產(chǎn)流程原材料的可追溯。目前，該產(chǎn)品已通過美國FDA DMF備案，DMF編號為036799，主要內(nèi)容涉及生產(chǎn)工藝和過程控制、物料控制等方面。
產(chǎn)品特點
- GMP級別產(chǎn)品，藥典標(biāo)準(zhǔn)放行檢測，滿足從研發(fā)到商業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)的使用需求
- 按照藥典標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法學(xué)開發(fā)和驗證，無抗生素殘留，不使用含動物源原材料
- 高標(biāo)準(zhǔn)的CGT蛋白酶GMP生產(chǎn)車間
- 高純度、高活性，可消化任何形式的DNA和RNA
- 符合申報要求，可提供申報用文件
- 工藝驗證、穩(wěn)定性驗證嚴(yán)格參考法規(guī)要求
- 完整的批生產(chǎn)和QC記錄
質(zhì)量要求
| 項目 | 標(biāo)準(zhǔn) | 檢測方法 |
|---|---|---|
| 外觀 | 無色透明溶液 | 目視檢查 |
| 活性 | ≥250 U/μl | 消化鮭魚精 DNA 法 |
| 比活 | ≥1.1×106 U/mg | 活性和蛋白質(zhì)量濃度比值 |
| 純度 | ≥95% | Tris-Bis PAGE |
| ≥99% | SEC-HPLC | |
| 蛋白酶殘留 | 無檢出 | 蛋白酶底物與樣品孵育 |
| 重金屬殘留 | ≤10 ppm | 中國藥典2020版第四部重金屬檢查法通則 (0821) |
| 細(xì)菌內(nèi)毒素含量 | ≤0.01 EU/1kU | 顯色法 |
| 宿主蛋白殘留 | ≤10 ppm | 酶聯(lián)免疫法 |
| 無菌檢查 | 無檢出 | 中國藥典2020版第四部無菌檢查法 通則 (1101) |
| 支原體 | 無檢出 | 支原體檢查法(qPCR熒光定量分析) |
| pH | 8.0 | 中國藥典2020版第四部pH值測定法通則 (0631) |
產(chǎn)品應(yīng)用
- 去除生物制品中的核酸殘留
- 適用于病毒的純化，如慢病毒、AAV、溶瘤病毒等
- 降低細(xì)胞裂解液和細(xì)胞上清的粘度，減少處理時間，提高蛋白產(chǎn)量
- 防止細(xì)胞結(jié)團
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
純度
Kactus
Bis-Tris PAGE（≥95%）
SEC-HPLC（≥99%）
Fig. 1 通過Bis-Tris PAGE和SEC-HPLC驗證，MaxNuclease純度分別≥95%、≥99%。
降解核酸效果
Kactus
Fig. 2 MaxNuclease可降解PCR產(chǎn)物、gDNA、質(zhì)粒、RNA等任何形式的核酸。
MaxNuclease ELISA Kit
病毒載體和疫苗等生物制品經(jīng)MaxNuclease去除核酸后，也需對體系中MaxNuclease的殘留進行評估。為此，愷佧生物精心開發(fā)了高靈敏、高特異性的殘留檢測試劑盒MaxNuclease ELISA Kit, 其靈敏度可達23 pg/ml。
MaxNuclease ELISA Kit檢測原理（雙抗夾心法）
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制示例
產(chǎn)品列表
| 貨號 | 名稱 | 種屬 | 表達體系 | 規(guī)格 | |
|---|---|---|---|---|---|
| NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶 | S. Marcescens | E.coli | 50KU/250KU/5MU | 立即詢價 |
| GMP-NUC-SE101 | MaxNuclease全能核酸酶（GMP grade） | S. Marcescens | E.coli | 250KU/5MU | 立即詢價 |
| NUC-SE00B | MaxNuclease ELISA Kit | / | / | 96T | 立即詢價 |
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